一种集成微流控系统快速检测高危型HPV
人类乳头瘤病毒(HPV)是宫颈癌和其他肛门生殖器官癌症的病因。HPV的筛查,特别是高危型HPV的检测,是宫颈癌发病率和死亡率大幅下降的原因。HPV检测迫切需要快速、准确、经济、高通量的方法。其中基于微流控的核酸检测技术已经成为一种有吸引力的即时诊断工具。然而,由于样品制备复杂、耗时,大多数微流控核酸检测过程中不包含核酸提取过程,限制了其临床广泛应用。近日,清华大学深圳国际生物制造工程实验室Shengli Mi和Jiajun Huang领导的课题组研发了一种集核酸纯化、等温扩增和实时荧光检测于一体的微流控系统用于高危型HPV的诊断。相关论文发表于Analyst杂志上。
在本文中,研究人员在设计离心式微流控时增加了核酸纯化的步伐,利用Chelex-100树脂颗粒吸附样本汇总的杂质和扩增抑制剂,通过离心将颗粒大于微流控管道的Chelex-100分离。通过综合评估,这是一种简单、快速有效的核酸纯化方法。尽管该方法纯化的核酸纯度不是很高,但是研究人员巧妙地将对核酸样本纯度要求低的环介导的等温扩增(LAMP)技术引入微流控,使该体系特异性高,无交叉反应,在多种条件下具有良好的稳定性,半定量结果与qPCR相似,具有良好的检测性能。此外,从核酸提取到离心操作,再到实时检测,整个过程在40分钟内完成,并能够同时进行40个高通量检测。由于它的简单性和可承受性,在资源有限的情况下具有广泛的潜力提供POCT检测。
图2 微流控芯片LAMP方法特异性评估
图3 微流控芯片LAMP方法的诊断性能
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