ATP荧光检测仪原理及应用

2017-09-01 13:39:47 苏州汶颢微流控技术股份有限公司已读

1.ATP 荧光检测原理 --生物荧光

ATP（Adenosine Triphosphate，三磷酸腺苷）是各种生命活动能量的直接来源，存在于所有活的动植物细胞、细菌和食物残渣中。ATP 荧光检测法是根据萤火虫发光原理开发的快速检测技术。即有氧条件下，虫荧光素酶催化虫荧光素和 ATP 之间发生氧化反应形成氧化荧光素并发出荧光，其强度与微生物数量呈比例关系。

ATP荧光检测仪原理及应用

图：所有生物细胞均含有ATP

荧光检测作用机理如下：

ATP荧光检测作用机理

ATP 快速检测卫生监控系统（以下统称为 ATP 荧光检测仪）即是通过检测荧光信号的强度从而得知待测目标被细菌、食物残渣等污染的程度，因此 ATP 的检测可以作为判断是否洁净的指标。

与其它评估方法相比，ATP 快速监控具有以下明显优势：

1）．实时监控：荧光素酶/荧光素/ATP 反应为即时反应，读数可以在数秒之内得到。因此可根据结果立即采取纠正措施。

2）．良好的可靠性和一致性：ATP 荧光检测仪可以确定出各种有机物和/ 或微生物残渣的存在。另外由于它使用独有的液体稳定试剂，因而检测结果准确、重复性好，为真实的洁净程序评估提供了可靠依据。

3）．直接和间接危险性评估：ATP 检测的是表面已有的生物物质和有生物残留物、易滋生微生物的潜在危险区域。食物残留区域是最易受到微生物污染或最易发生交叉污染的地方。

4）．使用简便：非专业技术人员也可轻松使用 ATP 荧光检测仪、拭子和软件，这使得日常使用趋于简单化。

5）．结果易于判读：标本检测结果以相对发光单位（RLU）来显示，它代表了污染物产生的光总量。检测结果可以直接与通过(Pass)/不通过(Fail)数值进行比较，通过则屏幕上显示为对号（√）；略微超出期望值的则显示警告符号（！），即介于通过和不通过之间的数值；结果超出最高限量值则显示叉号（×）。RLU读数越小表示表面越洁净。

2.ATP 荧光检测仪应用进展

ATP 生物发光技术产生于20 世纪70年代中期。1983 年，Moyer等最早提出细胞内源性ATP的含量可以反映细胞的活性和活细胞的数量。同年 Gronroos等也证实该技术是一种可靠、灵敏度高的确定细胞活性度的检测方法。20 世纪 80 年代，英国人首先研制出ATP检测仪检测系统，随后发展到欧洲、美国和日本。应用范围涉及食品加工、超市和饮食行业，检测内容包括微生物和食品残渣。1998 年，日本国会颁布了《关于食品制造过程管理高度化临时措施法》，其中即包含了应用 ATP 检测仪检测系统的内容。1999 年，日本还成立了 ATP 涂抹检查研究会，专门研究该方法的使用效率和应用领域，其内容之一就是在食品卫生监测领域中，解决现场微生物的检测问题。20 世纪末，一些 ATP检测仪检测系统及技术被引进我国，到目前为止，除个别省级卫生监督检测单位装备外，主要是在一些外资或合资企业中自行检测使用。2002 年，我国卫生部颁发了食品加工企业 HACCP 实施指南，鼓励食品加工企业引入ATP检测系统。近年来，虫荧光素酶已通过基因工程生产，价格大幅度降低，而且 ATP 生物发光法在检测食品微生物时简单、快速且灵敏度高，随着相关仪器的小型化，ATP 生物发光技术必将会在国内相关行业得到迅速普及。

2.ATP荧光检测仪的应用

ATP荧光检测仪通过生物发光原理对液态样本中的菌落总数进行检测，其中芯片的设计可以同时满足6个样本的检测，试剂用量少，效率高，可以应用在食品安全和环境领域。

ATP荧光检测仪在食品加工设备与环境方面应用